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新版本的樣本處理辦法
更新時(shí)間:2023-03-21   點(diǎn)擊次數(shù):827次

1、 血漿

用含抗凝劑的采血管或離心管收集血液標(biāo)本,標(biāo)本收集后30min內(nèi)4℃ 1000×g離心15min,取上清即血漿。將上清分裝多份,-20℃或-80℃保存,避免重復(fù)凍融。避免使用溶血或高血脂的標(biāo)本。

2、 細(xì)胞培養(yǎng)上清

取細(xì)胞培養(yǎng)今日上清到離心管,1000×g離心20min,除去細(xì)胞碎片及雜質(zhì),取上清,-20℃或-80℃保存,避免重復(fù)凍融。

3、 細(xì)胞裂解液

1. 吸去培養(yǎng)板內(nèi)的培養(yǎng)基,用yimei消化細(xì)胞,加適量培養(yǎng)基將細(xì)胞從培養(yǎng)板上吹下來(lái)。懸浮細(xì)胞可省掉。

2. 收集細(xì)胞懸液,1000×g離心10min,棄去培養(yǎng)基,用預(yù)冷的PBS潤(rùn)洗3次。

3. 參與適量的預(yù)冷PBS或細(xì)胞裂解液(臨用前參與蛋白酶抑制劑)重懸細(xì)胞。一般6孔板一個(gè)孔的細(xì)胞量需求150~250μL PBS重懸。

4. 將樣品放入-20℃或-80℃,使樣品冷凍,再放室溫凍結(jié)樣品,重復(fù)凍融幾回,使細(xì)胞充沛裂解。也可將樣品進(jìn)行超聲破碎,以抵達(dá)裂解的目的。

5. 4℃ 10000×g 離心10min,除去細(xì)胞碎片,取上清,-20℃或-80℃保存,避免重復(fù)凍融。

4、 血清

血清是常用于ELISA檢測(cè)的一類樣本,處理也比較簡(jiǎn)單。

用無(wú)熱原、無(wú)內(nèi)毒素的試管或離心管收集血液標(biāo)本,將試管或離心管室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)一夜,使血清分出。(將試管或離心管傾斜放置,使液面橫截面增大,能使血清更大程度的分出。)4℃ 1000×g離心20分鐘,仔細(xì)收集上清。建議將血清分裝多份,-20℃或-80℃保存,避免重復(fù)凍融。

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