酶聯(lián)免疫試劑盒是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的試驗(yàn)診斷辦法。由于其試劑安穩(wěn)、易保存，成果判別較客觀等要素，已廣泛使用在免疫學(xué)查驗(yàn)的各領(lǐng)域中。酶聯(lián)免疫試劑盒在國(guó)內(nèi)有許多種叫法：例如：ELISA檢測(cè)試劑盒、ELISA Kit、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等，比較常見(jiàn)的叫法是ELISA檢測(cè)試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒等。
酶聯(lián)免疫試劑盒中一般有3次加樣步聚，即加標(biāo)本，加酶結(jié)合物，加底物。加樣時(shí)應(yīng)將所加物加在ELISA試劑盒板孔的底部，防止加在孔壁上部，并留意不可濺起，不可發(fā)生氣泡。
加標(biāo)本一般用微量加樣器，按規(guī)則的量參加板孔中。每次加標(biāo)本應(yīng)更換吸嘴，以免發(fā)生交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測(cè)定需用稀釋的血清，可在試管中按規(guī)則的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中參加稀釋液，酶聯(lián)免疫試劑盒再在其間參加血清標(biāo)本，然后在微型震動(dòng)器上震動(dòng)1分鐘以保證混和。加酶結(jié)合物使用液和底物使用液時(shí)可用定量多道加液器，使加液進(jìn)程敏捷完成。在ELISA檢測(cè)試劑盒中一般有兩次抗原抗體反響，即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后。抗原抗體反響的完成需求有必定的溫度和時(shí)刻，這一保溫進(jìn)程稱(chēng)為溫育，有人稱(chēng)之為孵育，在ELISA中似不恰當(dāng)。
ELISA屬固相，抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生。以抗體包被的夾心法為例，參加板孔中的標(biāo)本，其間的抗原并不是都有均等的和固相抗結(jié)合的時(shí)機(jī)，只要貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體觸摸。這是一個(gè)逐漸平衡的進(jìn)程，因而需經(jīng)擴(kuò)散才干達(dá)到反響的結(jié)尾。在其后參加的酶標(biāo)記抗體與固相抗原的結(jié)合也同樣如此。這就是為什么ELISA反響總是需求必定時(shí)刻的溫育。
溫育常采用的溫度有43℃、37℃、室溫文4℃（冰箱溫度）等。37℃是試驗(yàn)室中常用的保溫溫度，也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的合適溫度。在樹(shù)立ELISA辦法作反響動(dòng)力學(xué)研討時(shí)，試驗(yàn)表明，兩次抗原抗體反響一般在37℃經(jīng)1-2小時(shí)，酶聯(lián)免疫試劑盒產(chǎn)品的可達(dá)高峰。為加速反響，可提高反響的溫度，有些試驗(yàn)在43℃進(jìn)行，但不宜采用更高的溫度?？乖贵w反響4℃更為*，在放射免疫測(cè)定中多使反響在冰箱中，以形成多的沉積。但因所需時(shí)刻太長(zhǎng)，在ELISA中一般不予采用。
在線咨詢(xún)