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瑞氏染液的配制方法
更新時(shí)間:2019-09-25   點(diǎn)擊次數(shù):2116次

(1) 瑞氏染液配制:

瑞氏染料 830gm或1g

甲醇(AR) 500ml或600ml

○先稱(chēng)干燥(事先放入溫箱干燥過(guò)夜)瑞氏染料放置乳缽內(nèi),用乳棒輕輕敲碎染料成粉末,再行研磨至聽(tīng)不到研芝麻聲即呈細(xì)粉末,加少許甘油或甲醇溶解研磨,使染料在乳缸內(nèi)顯“一面鏡”光澤,而無(wú)染料粉粒沉著。
○再加較多量甲醇研磨呈一面鏡光亮,靜置片刻,將上層液體倒入一清潔儲(chǔ)存瓶?jī)?nèi)(用甲醇空瓶),再加甲醇研磨,重復(fù)數(shù)次,至乳缽內(nèi)染料及甲醇用完為止,搖勻,密封瓶口。
○存室溫暗處,儲(chǔ)存愈久,則染料溶解、分解就越好,一般儲(chǔ)存3個(gè)月以上為佳。


(2) 緩沖液:       

●緩沖液作用:
○染色對(duì)氫離子濃度是十分敏感的,據(jù)觀察pH值的改變,可使蛋白質(zhì)與染料形成的化合物重新離解。
○緩沖液須保持一定的pH使染色穩(wěn)定,PBS的pH 一般在6.4~6.8,
○偏堿性染料可與緩沖液中酸基起中和作用,偏酸性染料則與緩沖液中的堿基起中和作用,使pH恒定。


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